如何选择正确的胎牛血清(FBS)?
胎牛血清(Fetal Bovine Serum, FBS)是细胞培养中常用的关键添加剂,正确选择需综合考虑以下因素:
1. 血清的来源与质量认证
产地:不同来源(如澳洲、南美、北美)的血清成分可能差异较大。
南美血清:价格较低,适合普通细胞系。
澳洲或新西兰血清:监管严格,内毒素低,适合干细胞、原代细胞或敏感细胞。
国产血清:来源可靠批次稳定,价格比进口便宜质量有保障,目前国内做的比较好的SERANA品牌,尤其是AD级胎牛血清,为主打产品。
质量认证:
检查是否通过 病毒检测(如BVDV、支原体、噬菌体等)。
是否有 ISO 9001/13485认证 或 GMP级生产(对临床前研究尤为重要)。
关注 内毒素水平(越低越好,通常需≤10 EU/mL)。
2. 血清的营养成分
总蛋白含量:一般在30-45 mg/mL之间,过高可能含过多杂质,过低可能营养不足。
关键生长因子:如IGF-1、EGF、FGF等,需根据细胞类型选择(如神经细胞需要更高神经生长因子)。
球蛋白(IgG)含量:若进行免疫相关实验(如疫苗生产),需低IgG或无IgG血清。
3. 适用性与批次测试
细胞类型匹配:
原代细胞或干细胞:需高等级血清(如:SERANA 胎牛血清/BUNSEN胎牛血清)
肿瘤细胞或常规细胞系:可选择经济型血清。(如:SERANA AD级胎牛血清、/BUNSEN胎牛血清)
批次测试:
购买前要求供应商提供 小样,进行细胞增殖、贴壁率、克隆形成率等测试。
关注血清的 促生长能力 和 细胞形态维持效果。
4. 灭活处理
热灭活(56℃, 30分钟):
可灭活补体系统,减少免疫实验干扰。
但会破坏部分生长因子,通常仅在特定实验(如免疫学、干细胞分化)中需要。
非灭活血清:适用于大多数常规培养,保留更多活性成分。
5. 价格与供应链稳定性
避免低价陷阱:低价血清可能来源不明或质量不稳定。
选择可靠供应商:品牌授权代理商渠道购买。
批量采购:同一实验尽量使用同一批次血清,减少批次差异影响。
胎牛血清对细胞的用途
促进细胞增殖:
提供生长因子(如IGF、FGF)和激素,刺激细胞分裂。
营养支持:
含葡萄糖、氨基酸、维生素、微量元素等基础营养物质。
保护细胞:
抗胰酶活性(保护细胞在传代时免受损伤)。
缓冲pH波动,维持培养液稳定性。
贴壁与铺展:
提供纤维连接蛋白(Fibronectin)、层粘连蛋白(Laminin)等,帮助贴壁依赖性细胞附着。
运输脂类与激素:
白蛋白等结合蛋白协助疏水性分子(如胆固醇、激素)的运输。
注意事项
潜在风险:
批次间差异可能影响实验重复性。
存在未知成分(如外泌体、残留抗体),可能干扰特定实验。
替代方案:
无血清培养基:适合成分明确的实验(如药物筛选),但需额外添加生长因子。
合成血清替代物:如KnockOut™ SR,用于干细胞培养。
总结
选择胎牛血清需结合细胞类型、实验目的和质量要求。建议优先通过小样测试验证效果,并确保供应商提供完整质检报告。对于关键实验(如发表论文、药物开发),推荐使用高规格血清以减少风险。
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