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产品名称
产品编号
规格
价格(元)
Plant Tissue Direct PCR Kit (With Dye)
HRF0241
100 T
800.00
HRF0252
200 T
1300.00
产品描述
植物组织直接PCR试剂盒是一款可直接对不同类型植物叶片进行PCR扩增的试剂盒,适应性广、稳定性强。试剂盒采用的裂解缓冲液体系,可以快速的裂解多种植物样品并释放出基因组DNA,不需要除去蛋白、RNA或次生代谢产物等,即可将释放出的基因组DNA作为模板直接用于PCR反应。此外,样品使用量少,低至1 mm植物叶片即可进行实验。
本试剂盒中提供的2× Plant Master Mix具有很强的扩增兼容性,能直接以待测样品裂解液为模板,进行高效特异性扩增。该试剂为2倍浓缩PCR反应混合液,包含了用于PCR扩增除模板和引物外的所有组分,大大简化操作过程,降低污染几率。
该试剂盒可用于转基因植株鉴定、植物基因分型等。
植物组织直接PCR试剂盒产品组分
类别
编号
组分
产品编号/规格
储存
HRF0241(100 T)
HRF0242(200 T)
Part I
HRF024-A
Buffer P1
1.25 mL × 2
5 mL × 2
4℃
HRF024-B
Buffer P2
500 μL
1 mL × 2
Part II
HRF024-C
2× Plant Master Mixa
-20℃
a)2× Plant Master Mix:包含热启动Taq DNA聚合酶、dNTP混合物、MgCl2、反应缓冲液、PCR反应增强剂、优化剂以及稳定剂等,同时包含电泳Loading Buffer, PCR完成之后可直接电泳。
运输方法
冰袋运输。
保存方法
1. 试剂HRF024-A【Buffer P1】,置于4℃保存。有效期1年。
2. 试剂HRF024-B【Buffer P2】,中和裂解产物,利于更长时间保存样本,置于4℃保存。有效期1年。
3. 试剂HRF024-C【2 × Plant Master Mix】,-20℃保存,避免反复冻融。有效期1年。
操作方法
植物叶片——研磨裂解法:
①研磨仪破碎:将直径5 mm左右的叶片置于50 μL Buffer P1中,用研磨仪加钢珠(钢珠直径3mm左右,共2个)破碎叶片(45 Hz,1 min),叶片破碎后溶液呈现绿色,瞬时离心,上清液请放在4℃备用,取1 μL用于PCR扩增。
②枪头捣碎:推荐使用幼嫩叶片。将直径5 mm左右的叶片置于50 μL Buffer P1中,用枪头将叶片捣碎,捣碎后溶液呈现绿色,瞬时离心,上清液请放在4℃备用,取1 μL用于PCR扩增。
加热裂解法:推荐使用幼嫩叶片。将直径5 mm左右的叶片置于50 μL Buffer P1中,95℃加热5-10 min(确保裂解液浸没叶片),较难裂解的叶片(老叶片)可适当延长时间(10-20 min),加热裂解后溶液呈现绿色,震荡混匀,瞬时离心,上清液请放在4℃备用,取1 μL用于PCR扩增。
直接法:推荐使用幼嫩叶片。使用打孔器或者刀,将直径1 mm左右的叶片直接加入到PCR反应体系中;复杂样本或者是长片段的扩增,推荐使用直径<1 mm的叶片。
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